Первый храм Рождества Христова, бывший уже в XVII в., существовал до 1722 г., когда был заменен новым, который сгорел в 1731 году: «с 12 на 13 февраля в полночь, говорит Квитка, прежняя церковь Рождества Христова в Харькове за рекою Лопанью сгорела»; новый (третий) храм освящен в 1735 году; четвертый, каменный ныне существующий храм освящен в 1783 году». Но в нем произведены с того времени изменения: колокольня с теплой церковью внутри построены к 1801 г., а в 1860 г. церковь расширена — пристройкой колокольни с двумя теплыми приделами; неизмененной в храме осталась середин храма с куполом и алтарь.

С видом четвертого храма, какой он имел вскоре после его построения, знакомился по известному виду Харькова в 1787 г., а по рисунку Шепфлинга этот же храм предстает перед нами в том виде, в каком он был в начале XIX в.

Из памятников XVIII века в храме сохранилось Евангелие 1748 г.: оклад на нем 1834 г., но древний оклад данного Евангелия перенесен на Евангелие 1833 года, остались только наугольники с изображением (литых) Евангелистов и ценьральный медальон с изображением Рождества Христова: поклонение волхвов Христу Младенцу. На оборотной стороне в центральном медальоне Рождество Пресвятой Богородицы в оригинальной композиции: Иоаким подает руку Анне, лежащей на ложе.

Другие Евангелия, имеющиеся в церкви уже XIX в.:

1. Ев. м. п. 1809 г. с окладом серебрян., позолоченным 1814 г.

2. Ев. м. п. 1841 также с прекрасным окладом.

3. Ев. м. п. 1815, с богатым окладом 1818 г. с изображениями финифтью Евангелистов, Воскресения Христова.

Далее хорошей работы крест с изображениями финифтью, 1832 г. Иконостас в церкви работы 1824 г. В нем сохранилось много икон этого времени, прикрытых богатыми серебряными ризами: Рождество Христово (риза 1831 г.), Иисус Христос (риза 1822 г.), Евангелисты на царских дверях (риза 1835 г.), Богородицы (1822 г.), рождество Иоанна Крестителя (1822 г.), Святые Козьма и Екатерина (1842 г.). Имеется икона Воскресения Христова, сложной композиции, в виде Сошествия Христа в ад, с праздниками, начала XIX в., с ризой серебряной 1815 г.